Kit de RT-qPCR directe
Description du kit :
◮ Le kit RT-qPCR direct, utilisant la transcriptase inverse Foreasy et l'ADN polymérase Foreasy HS Taq développée par Foregene, avec un tampon de réaction unique, confère à ce kit une résistance et une compatibilité élevées, et il peut directement tester la réaction en utilisant le système Foregene Lysis comme modèle.Ce kit peut s'appliquer au kit de détection d'acide nucléique COVID-19 et au développement d'autres kits de détection d'acide nucléique de bactéries pathogènes.
Description
Le kit Direct RT-qPCR fournit un tampon RT-qPCR emballé séparément et une enzyme hautement efficaceMélange (Taq、M-MLV、RI), ce qui le rend pratique pour la création de kits et de systèmes back-endajustement，au sein d'une simple vérification.
Caractéristiques
500T, 50 000T
Composants du kit
| Contenu du kit (système de réaction de 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50 000 t | |
| Mélange d'enzymes directes | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2 × tampon RT-qPCR direct | 1 millilitre×5 | 500 ml×1 |
| Instruction | 1 | 1 |
Étapes de fonctionnement
Avant la préparation des réactifs, tous les réactifs du kit doivent être décongelés à température ambiante et mélangés doucement.
A: Préparer of modèle et réactif
1. Préparez le modèle d'ARN préparé (il est recommandé d'utiliser le kit de la série Foregene Total RNA Isolation Kit pour extraire et purifier le modèle d'ARN) ou un échantillon de produit de craquage (il est recommandé d'utiliser le système Foregene Lysis), des amorces spécifiques (10 μM) et d'autres consommables pertinents, instrument.
2. Placez le tampon RT-qPCR direct 2×, le ddH2O sans RNase et le colorant de référence ROX 20× (s'il's nécessaire) dans la boîte avec de la glace, en les faisant fondre naturellement et en mélangeant doucement.
B: Préparer of RT-qPCR système
Tableau 1 : Préparer of RT-qPCR ssystème
| Composant | Volume | Concentration finale |
| 2 × tampon RT-qPCR direct | 10 μL | 1× |
| Mélange d'enzymes directes | 1μL | |
| Amorce avant (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Amorce inverse (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Sonde (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Modèle (ARN ou lysat) | X μL | |
| 20 × colorant de référence ROX | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Volume total | 20μL |
C: Ensemble le RT-qPCR réaction programme
Tableau 2 : RT-qPCR réagiron programme paramètre (pour exemple: deux-marcher méthode)
| Marcher | Température | Temps | Cycles | Contenu | |
| 1 | 50℃ | 15 min | 1* | 1 | Transcription inversée |
| 2 | 95℃ | 1 minute | 1 | Pré-dénaturation | |
| 3 | 95℃ | 10 s | 40-45 | Dénaturation | |
| 60℃ | 30 s 2* | Recuit/Extension | |||
Stockage et durée de conservation
-Le kit doit être stocké à -20± 5℃.La durée de validité est de 12 mois.
-Éviter les cycles de gel-dégel répétés (<5 cycles).
