Kit d'isolement d'ARN total animal Kits d'extraction et de purification d'ARN total pour tissus et cellules animaux
Description du kit :
Extrayez rapidement et efficacement l'ARN total de haute pureté et de haute qualité de divers tissus animaux.
Pas besoin de s'inquiéter de la dégradation de l'ARN.L'ensemble du système est sans RNase
Éliminer efficacement l'ADN à l'aide de la colonne de nettoyage d'ADN
Supprimer l'ADN sans ajouter de DNase
Simple—toutes les opérations sont effectuées à température ambiante
Rapide—l'opération peut être terminée en 30 minutes
Sûr—aucun réactif organique utilisé
Haute pureté—OD260/280≈1.8-2.1
Descriptions des trousses
50 préparations, 200 préparations
Ce kit utilise lecolonne de spin et formuledéveloppé par notre société, qui peut extraire l'ARN total de haute pureté et de haute qualité de divers tissus animaux avec une grande efficacité. Il fournit une colonne de nettoyage d'ADN efficace, qui peut facilement séparer et adsorber l'ADN génomique du surnageant et du lysat tissulaire, simple et rapide ;La colonne d'ARN uniquement peut lier efficacement l'ARN et peut être traitée simultanément avec une formule unique Beaucoup d'échantillons.
L'ensemble du système est exempt de RNase, de sorte que l'ARN extrait n'est pas dégradé ;Buffer RW1, système de lavage de tampon Buffer RW2, de sorte que l'ARN obtenu soit exempt de pollution par les protéines, l'ADN, les ions et les composés organiques.
Composants du kit
| Kit d'isolement d'ARN total animal | ||
| Composants du kit | RE-03011 | RE-03014 |
| 50T | 200T | |
| Tampon RL1* | 25ml | 100ml |
| Tampon RL2 | 15ml | 60ml |
| Tampon RW1* | 25ml | 100ml |
| Tampon RW2 | 24ml | 96ml |
| ddH2O sans RNase | 10ml | 40ml |
| Colonne d'ARN uniquement | 50 | 200 |
| Colonne de nettoyage d'ADN | 50 | 200 |
| Manuel d'instructions | 1 pièce | 1 pièce |
Information produit
| Format | Colonne de rotation | Composant de purification | Colonne Foregene, réactif |
| Flux | 1-24 échantillons | Temps par préparation | ~30 min (24 échantillons) |
| Centrifuger | Centrifugeuse de bureau | Séparation par pyrolyse | Séparation centrifuge |
| Goûter | Tissu animal;cellule | Quantité d'échantillons | Tissu : 10-20 mg ;Cellule :(1-5)×106 |
| Volume d'élution | 50-200 μL | Volume de chargement maximal | 850 μL |
Fonctionnalités et avantages
■ Pas besoin de s'inquiéter de la dégradation de l'ARN ;l'ensemble du système est exempt de RNase
■ Élimine efficacement l'ADN à l'aide de la colonne de nettoyage d'ADN
■ Retirer l'ADN sans ajouter de DNase
■ Simple-toutes les opérations sont effectuées à température ambiante
■ L'opération rapide peut être complétée en 30 minutes
■ Sûr - aucun réactif organique requis
■ Haute pureté -OD260/280≈1.8-2.1
Demande de kit
Il convient à l'extraction et à la purification de l'ARN total à partir d'une variété de tissus animaux frais ou congelés ou de cellules cultivées.
Paramètres du produit
■ Applications aval : synthèse d'ADNc premier brin, RT-PCR, clonage moléculaire, Northern Blot, etc.
■ Échantillons : tissus animaux, cellules cultivées
■ Dosage : Tissus 10-20mg, Cellules(2-5)×106
■ Capacité maximale de liaison à l'ADN de la colonne de purification : 80 μg
■ Volume d'élution : 50-200 μl
Diagramme
Kit d'isolement d'ARN total animal traité 20mg
Échantillons de souris frais, prélever 5 % d'ARN total purifié 1 % d'agar
Électrophorèse au glycogel
1 : Rate 2 : Rein
3 : Foie 4 : Cœur
Stockage et durée de conservation
Le kit peut être conservé pendant 24 mois à température ambiante (15–25 ℃) ou 2–8 ℃ plus longtemps.Le tampon RL1 peut être stocké à 4 ℃ pendant 1 mois après l'ajout de β-mercaptoéthanol (facultatif).
Articles cités
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2.SI:18.187 :He X, Hong W, Yang J, et al.L'apoptose spontanée des cellules dans la préparation de cellules souches thérapeutiques exerce des effets immunomodulateurs par la libération de phosphatidylsérine.Signal Transduct Cible Ther.14 juillet 2021;6(1):270.doi : 10.1038/s41392-021-00688-z.
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Kits d'isolation d'ARN pour autres sources d'échantillonssont disponibles:
Cellulaire, végétal, viral, sanguin, etc.
L'ARN n'est pas extrait ou les rendements d'ARN sont faibles
Il existe souvent une variété de facteurs qui affectent l'efficacité de la récupération, tels que : la teneur en ARN de l'échantillon de tissu, la méthode de fonctionnement, le volume d'élution, etc.
1. Un bain de glace ou une centrifugation cryogénique (4 °C) a été effectuée pendant l'opération.
Recommandation : Opérer à température ambiante (15-25°C) tout au long du processus, ne pas glacer le bain et centrifuger à basse température.
2. Mauvaise conservation des échantillons ou temps de stockage excessif des échantillons.
Recommandation : Conserver les échantillons à -80 °C ou les congeler dans de l'azote liquide et éviter les utilisations répétées de congélation-décongélation ;essayez d'utiliser des tissus frais ou des cellules cultivées pour l'extraction de l'ARN.
3. Lyse d'échantillon insuffisante.
Recommandation : lors de l'homogénéisation des tissus, assurez-vous que le tissu est suffisamment homogénéisé et que les cellules tissulaires sont suffisamment divisées pour expliquer la libération d'ARN.
4. L'éluant n'est pas ajouté correctement.
Recommandation : confirmez que ddH sans RNase2O est ajouté goutte à goutte au milieu de la membrane de la colonne de purification.
5. Le volume correct d'éthanol absolu n'a pas été ajouté au tampon RL2 ou au tampon RW2.
Recommandation : Suivez les instructions, ajoutez le volume correct d'éthanol absolu au tampon RL2 et au tampon RW2 et mélangez bien avant d'utiliser le kit.
6. Le dosage de l'échantillon de tissu n'est pas approprié.
Recommandation : Utiliser 10-20 mg de tissu ou (1-5) × 106cellules par 500 ul de tampon RL1, car une utilisation excessive de tissu peut entraîner une réduction de l'extraction d'ARN.
7. Volume d'élution incorrect ou élution incomplète.
Recommandation : Le volume d'élution de la colonne de purification est de 50-200 μl ;si l'effet d'élution n'est pas satisfaisant, il est recommandé de prolonger le temps de placement à température ambiante après avoir ajouté du ddH sans RNase préchauffé2O, par exemple pendant 5-10 min.
8. La colonne de purification contient des résidus d'éthanol après le lavage du tampon RW2.
Recommandation : S'il y a des résidus d'éthanol après le lavage du tampon RW2, videz la centrifugation du tube pendant 1 min, le temps de l'opération de centrifugation du tube vide peut être augmenté à 2 min, ou la colonne de purification peut être placée à température ambiante pendant 5 min pour éliminer correctement l'éthanol résiduel.
L'ARN purifié est dégradé
La qualité de l'ARN purifié est liée à des facteurs tels que la conservation de l'échantillon, la contamination par la RNase et la manipulation, etc.
1. Les échantillons de tissus ne sont pas conservés à temps.
Recommandation : si les échantillons de tissus ou les cellules ne sont pas utilisés en temps opportun après le prélèvement, cryoconservez-les immédiatement à -80 °C ou dans de l'azote liquide.Pour extraire l'ARN, utilisez autant que possible un échantillon de tissu ou de cellule nouvellement prélevé.
2. Congélation-décongélation répétée des échantillons de tissus.
Recommandation : lors du stockage des échantillons de tissus, il est préférable de les couper en petits morceaux pour les conserver, et de retirer l'un des morceaux lors de leur utilisation pour éviter la congélation-décongélation répétée de l'échantillon et la dégradation de l'ARN.
3. La RNase est introduite ou non avec des gants jetables, des masques, etc. pendant l'opération.
Recommandation : Les expériences d'extraction d'ARN sont mieux réalisées dans des salles de manipulation d'ARN séparées et la table est dégagée avant l'expérience.
Portez des gants et des masques jetables pendant l'expérience pour minimiser la dégradation de l'ARN causée par l'introduction de la RNase.
4. Les réactifs sont contaminés par la RNase pendant l'utilisation.
Recommandation : remplacer par un nouveau kit d'isolement d'ARN total animal pour les expériences connexes.
5. Les tubes à centrifuger, les embouts, etc. utilisés dans la manipulation de l'ARN sont contaminés par la RNase.
Recommandation : Vérifiez que les tubes à centrifuger, pointes, pipettes, etc. utilisés dans l'extraction d'ARN sont tous exempts de RNase.
L'ARN obtenu purifié affecte les expériences en aval
L'ARN purifié par la colonne de purification, si les ions de sel, la teneur en protéines est trop importante affectera l'expérience en aval, telle que : transcription inverse, Northern Blot et al.
1. L'ARN élué a des résidus d'ions sel.
Recommandation : Confirmez que le volume correct d'éthanol a été ajouté au tampon RW2 et effectuez 2 lavages de colonne de purification à la vitesse de centrifugation indiquée pour le fonctionnement ;s'il y a des résidus d'ions sel, laissez la colonne de purification dans le tampon RW2 pendant 5 min à température ambiante et effectuez une centrifugation pour maximiser l'élimination de la contamination par le sel.
2. Résidu d'éthanol dans l'ARN élué.
Recommandation : Confirmez qu'après le lavage du tampon RW2, effectuez l'opération de centrifugation du tube vide à la vitesse de centrifugation indiquée pour le fonctionnement, augmentez le temps de l'opération de centrifugation du tube vide à 2 min s'il reste encore des résidus d'éthanol, ou laissez-le à température ambiante pendant 5 min après la centrifugation du tube vide pour maximiser l'élimination des résidus d'éthanol.
