Trousse ForeDirect RT-qPCR
Description
Le kit ForeDirect RT-qPCR est conçu pour l'amplification directe d'ARN en temps réel à partir de collections d'écouvillons sans processus de purification d'ARN.Ce kit complète les cycles de qRT-PCR en une heure.Le mélange d'enzymes est un mélange optimisé de transcriptase inverse, d'ADN polymérase Hot-Start Taq et d'inhibiteur de RNase.Le tampon de réaction contient tous les composants requis, y compris les composants de tampon optimisés, Mg2+, dUTP et dNTP.
Caractéristiques
100T
Composants du kit
Agent de libération d'acide nucléique |
Protecteur d'ARN |
2 × tampon RT-qPCR |
Mélange d'enzymes (Taq&M-MLV) |
Instructions |
Demande de RAP
1. Une fois que les tubes de réaction PCR ont été brièvement centrifugés, placez-les dans le réservoir d'échantillon de l'instrument d'amplification.
2. Protocole thermique
Marcher | Température | Temps | Cycles | |
1 | Transcription inversée | 50℃ | 15 minutes | 1 |
2 | Pré-dénaturation | 95℃ | 1 minute | 1 |
3 | Dénaturation | 95℃ | 10 secondes | 42 |
4 | Recuit/Extension | 60℃ | 30 secondes |
Note:Le signal fluorescent a été détecté immédiatement après l'étape d'extension de chaque cycle.
3. Après le réglage, enregistrez le fichier et exécutez le programme de réaction.
Étapes de fonctionnement
Avant la préparation des réactifs, tous les réactifs du kit doivent être décongelés à température ambiante et mélangés doucement.
Préparation des réactifs
1. Préparer le mélange de libération d'acide nucléique
Composant | Volume par échantillon ou contrôle |
Agent de libération d'acide nucléique | 5μL |
Protecteur d'ARN | 0,5 μL |
2. Préparer le mélange réactionnel
Composant | Volume par échantillon ou contrôle |
2 × tampon RT-qPCR | 15 μL |
Mélange d'enzymes (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
Amorces et sondes | 1μL |
Stockage et durée de conservation
-Le kit doit être stocké à -20± 5℃.La durée de validité est de 12 mois.
-Éviter les cycles de gel-dégel répétés (<5 cycles).