Kit d'isolement d'ADN viral et d'ARN Kits de préparation de purification d'extraction d'ADN viral et d'ARN
Caractéristiques
50 préparations, 200 préparations
Le kit d'isolement d'extraction de purification d'acide nucléique d'ARN viral utilise la colonne de rotation et la formule développées par Foregene, qui peuvent extraire efficacement l'ARN viral de haute pureté et de haute qualité à partir d'échantillons tels que le plasma, le sérum, les fluides corporels acellulaires et le surnageant de culture cellulaire.Le kit ajoute spécifiquement de l'acrylamide linéaire, qui peut facilement capturer de petites quantités d'ARN à partir des échantillons.La colonne RNA-Only peut lier efficacement l'ARN.Le kit peut traiter un grand nombre d'échantillons en même temps.
L'ensemble du kit ne contient pas de RNase, donc l'ARN purifié ne sera pas dégradé.Le tampon viRW1 et le tampon viRW2 peuvent garantir que l'acide nucléique viral obtenu est exempt de protéines, de nucléases ou d'autres impuretés, qui peuvent être utilisées directement pour des expériences de biologie moléculaire en aval.
Composants du kit
| Acrylamide linéaire |
| Tampon DRL |
| Tampon RW1, Tampon RW2 |
| ddH sans RNase2O |
| Colonne ADN/ARN |
| Instructions |
Fonctionnalités et avantages
■ Fonctionnement à température ambiante (15-25℃) tout au long du processus, sans bain de glace et centrifugation à basse température.
■ Kit complet RNase-Free, pas besoin de s'inquiéter de la dégradation de l'ARN.
■ Rendement élevé d'acide nucléique : la colonne ADN/ARN uniquement et la formule unique peuvent purifier efficacement l'ADN et l'ARN.
■ Grande capacité de traitement d'échantillons : jusqu'à 200 μl d'échantillons peuvent être traités à chaque fois.
■ Vitesse rapide : facile à utiliser et peut être terminé en 20 minutes.
■ Sécurité : aucun réactif organique n'est nécessaire.
■ Haute qualité : Les fragments d'ARN purifiés sont d'une grande pureté, exempts de protéines et autres impuretés, et peuvent répondre à diverses applications expérimentales en aval.
Demande de kit
Il convient à l'extraction et à la purification de l'acide nucléique viral dans des échantillons tels que le plasma, le sérum, les fluides corporels acellulaires et le surnageant de culture cellulaire.
Flux de travail
Diagramme
Stockage et durée de conservation
■ Ce kit peut être stocké pendant 24 mois dans des conditions sèches à température ambiante (15-25℃);s'il doit être stocké plus longtemps, il peut être stocké entre 2 et 8 ℃.
■ La solution d'acrylamide linéaire peut être conservée à température ambiante pendant 7 jours ;après réception du kit, veuillez le retirer et le conserver à -20°C.
■ Après avoir ajouté l'acrylamide linéaire au tampon DRL, il peut être stocké à 2-8°C jusqu'à 48h.Veuillez utiliser la solution prête à l'emploi.
Guide d'analyse des problèmes
Ce qui suit est une analyse des problèmes qui peuvent être rencontrés dans l'extraction de l'ADN/ARN viral, dans l'espoir d'être utile à vos expériences.De plus, pour d'autres problèmes expérimentaux ou techniques autres que les instructions d'utilisation et l'analyse des problèmes, nous avons un support technique dédié pour vous aider.Si vous avez des besoins, veuillez nous contacter : 028-83360257 ou E-mail :
Tech@foregene.com.
Aucune extraction d'acide nucléique ou faible rendement d'acide nucléique
De nombreux facteurs affectent généralement l'efficacité de la récupération, tels que : la teneur en acide nucléique de l'échantillon, la méthode de fonctionnement, le volume d'élution, etc.
Analyse des causes communes :
1. Un bain de glace ou une centrifugation à basse température (4°C) a été effectuée pendant la procédure.
Suggestion : Opérer à température ambiante (15-25°C) tout au long du processus, ne pas faire de bain de glace et de centrifugation à basse température.
2. L'échantillon n'a pas été stocké correctement ou l'échantillon a été stocké trop longtemps.
Recommandation : conserver les échantillons à -80 °C et éviter les congélations et décongélations répétées ;essayez d'utiliser des échantillons fraîchement prélevés pour l'extraction d'acide nucléique.
3. Lyse d'échantillon insuffisante.
Recommandation : Veuillez vous assurer que l'échantillon et la solution de travail de lyse sont soigneusement mélangés et incubés à température ambiante (15-25 °C) pendant 10 minutes.
4. Ajout incorrect d'éluant.
Suggestion : assurez-vous que ddH2O sans RNase est ajouté goutte à goutte au milieu de la membrane de la colonne de purification et ne le laissez pas tomber sur l'anneau de la colonne de purification.
5. Le volume correct d'éthanol absolu n'a pas été ajouté au tampon RW2.
Suggestion : veuillez suivre les instructions, ajouter le volume correct d'éthanol absolu au tampon RW2 et bien mélanger avant d'utiliser le kit.
6. Volume d'échantillon inapproprié.
Suggestion : 200 µl d'échantillon sont traités pour chaque 500 µl de tampon DRL.Un traitement excessif des échantillons entraînera un rendement d'extraction d'acide nucléique plus faible.
7. Volume d'élution inapproprié ou élution incomplète.
Recommandation : Le volume d'éluant de la colonne de purification est de 30 à 50 μl ;si l'effet d'élution n'est pas satisfaisant, il est recommandé de prolonger le temps à température ambiante après l'ajout de ddH2O sans RNase préchauffé, par exemple 5 à 10 min.
8. L'éthanol reste sur la colonne après le lavage avec le tampon RW2.
Suggestion : S'il reste de l'éthanol après centrifugation avec le tampon RW2 pendant 2 minutes, la colonne peut être placée à température ambiante pendant 5 minutes après la centrifugation pour éliminer complètement l'éthanol résiduel.
L'acide nucléique purifié est dégradé
La qualité de l'acide nucléique purifié est liée à la conservation de l'échantillon, à la contamination par la RNase, au fonctionnement et à d'autres facteurs.Analyse des causes communes :
1. Les échantillons collectés n'ont pas été stockés à temps.
Suggestion : si l'échantillon n'est pas utilisé à temps après le prélèvement, veuillez le stocker immédiatement à -80 °C à basse température.Pour l'extraction d'ARN, essayez d'utiliser des échantillons fraîchement prélevés.
2. Recueillir des échantillons et congeler et décongeler à plusieurs reprises.
Suggestion : éviter de congeler et de décongeler (pas plus d'une fois) pendant la collecte et le stockage des échantillons, sinon le rendement en acides nucléiques sera réduit.
3. La RNase est introduite dans la salle d'opération ou des gants jetables, des masques, etc. ne sont pas portés.
Recommandation : Les expériences d'extraction d'ARN sont mieux réalisées dans une salle d'opération d'ARN séparée, et la table de laboratoire doit être nettoyée avant l'expérience.
Portez des gants et des masques jetables pendant l'expérience pour éviter au maximum la dégradation de l'ARN causée par l'introduction de la RNase.
4. Le réactif a été contaminé par la RNase pendant l'utilisation.
Recommandation : remplacer par un nouveau kit d'isolement d'ADN/ARN viral pour les expériences connexes.
5. Les tubes de centrifugation et les embouts de pipette utilisés pour la manipulation de l'ARN sont contaminés par la RNase.
Suggestion : assurez-vous que les tubes à centrifuger, les embouts de pipette, les pipettes, etc. utilisés pour l'extraction de l'ARN sont tous exempts de RNase.
L'acide nucléique purifié affecte les expériences en aval
ADN et ARN purifiés par la colonne de purification, si la teneur en ions sel et en protéines est trop élevée, cela affectera les expériences en aval, telles que : amplification PCR, transcription inverse, etc.
1. L'ADN et l'ARN élués contiennent des ions de sel résiduels.
Suggestion : Assurez-vous que le volume correct d'éthanol absolu est ajouté au tampon RW2 et lavez la colonne de purification deux fois à la vitesse de centrifugation spécifiée dans les instructions d'utilisation ;Effectuez une centrifugation pour minimiser la contamination par les ions de sel.
2. L'ADN et l'ARN élués ont des résidus d'éthanol.
Suggestion : Après avoir confirmé le lavage avec le tampon RW2, effectuez une centrifugation du tube vide à la vitesse de centrifugation indiquée dans le mode d'emploi ;s'il reste des résidus d'éthanol, vous pouvez centrifuger le tube vide puis le placer à température ambiante pendant 5 minutes pour éliminer au maximum les résidus d'éthanol.
Manuels d'utilisation:
Manuel d'instructions du kit d'isolement de l'ADN viral et de l'ARN
