Fabricant chinois de prémélange concentré 2 × pour échantillon non purifié Sonde multiplex directe PCR quantitative en temps réel Qpcr Mix Plus U
L'organisation conserve le concept de procédure "gestion scientifique, primauté de la haute qualité et de l'efficacité, acheteur suprême pour le fabricant chinois de prémélange concentré 2 × pour échantillon non purifié sonde multiplex directe PCR quantitative en temps réel Qpcr Mix Plus U, notre entreprise se consacre à offrir aux clients des produits de qualité supérieure significatifs et sécurisés à un prix agressif, rendant chaque client satisfait de nos services.
L'organisation conserve le concept de procédure "gestion scientifique, primauté de la qualité et de l'efficacité, acheteur suprême pourChine Taq ADN polymérase et Qpcr, Notre société a une force abondante et possède un système de réseau de vente stable et parfait.Nous souhaitons pouvoir établir de bonnes relations commerciales avec tous les clients du pays et de l'étranger sur la base d'avantages mutuels.
Principes de conception des amorces PCR en temps réel
Amorce directe et amorce inverse
Pour la PCR en temps réel, la conception des amorces est très importante.Les amorces sont liées à la spécificité et à l'efficacité de l'amplification PCR et peuvent être conçues en référence aux principes suivants :
- Longueur de l'amorce : 18-30 pb.
- Teneur en GC : 40-60 %.
- Valeur Tm : un logiciel de conception d'amorce, tel que Primer 5, peut donner la valeur Tm de l'amorce.Les valeurs Tm des amorces en amont et en aval doivent être aussi proches que possible.La formule de calcul de Tm peut également être utilisée : Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Lors de l'exécution de la PCR, une température inférieure à la valeur Tm de l'amorce de 5 ° C est généralement sélectionnée comme température d'annelage (l'augmentation correspondante de la température d'annelage peut augmenter la spécificité de la réaction PCR).
- Amorces et produits PCR :
- La longueur du produit d'amplification PCR de l'amorce de conception est de préférence de 100 à 150 pb.
- Les amorces de conception dans la zone structurelle secondaire du gabarit doivent être évitées autant que possible.
- Éviter la formation de 2 bases complémentaires ou plus entre les extrémités 3' des amorces amont et aval.
- La base terminale de l'amorce 3' ne peut pas être présente avec 3 G ou C consécutifs supplémentaires.
- Les amorces elles-mêmes ne peuvent pas avoir de structures complémentaires, sinon une structure en épingle à cheveux se formera, affectant l'amplification par PCR.
- L'ATCG doit être réparti aussi uniformément que possible dans la séquence d'amorces et la base terminale 3 'doit être évitée comme T.
annexe1:Cell DirectRT-qPCR Composant du kitt supplément pack
1. Solution de lyse cellulaire
Solution de lyse cellulaire | |||
Composants du kit (système de lyse 24 puits / puits) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100T | 500 T | ||
Partieje | Tampon CL | 20ml | 100ml |
Foregene Protéase Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Tampon ST | 1 ml × 2 | 10ml | |
PartieII | Effaceur d'ADN | 400 μl | 1 ml × 2 |
Mélange RT | |
Composants du kit (système de réaction de 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200T | |
5× Mélange RT direct | 800 μl |
ddH sans RNase2O | 1,7 ml × 2 |
Mélange qPCR | ||
Composants du kit (système de réaction de 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200T | 1000T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20 × colorant de référence ROX | 40 μl | 200 μl |
ddH sans RNase2O | 1,7 ml | 10ml |
L'organisation conserve le concept de procédure "gestion scientifique, primauté de la haute qualité et de l'efficacité, acheteur suprême pour le fabricant chinois de prémélange concentré 2 × pour échantillon non purifié sonde multiplex directe PCR quantitative en temps réel Qpcr Mix Plus U, notre entreprise se consacre à offrir aux clients des produits de qualité supérieure significatifs et sécurisés à un prix agressif, rendant chaque client satisfait de nos services.
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Principes de conception des amorces PCR en temps réel
Amorce directe et amorce inverse
Pour la PCR en temps réel, la conception des amorces est très importante.Les amorces sont liées à la spécificité et à l'efficacité de l'amplification PCR et peuvent être conçues en référence aux principes suivants :
- Longueur de l'amorce : 18-30 pb.
- Teneur en GC : 40-60 %.
- Valeur Tm : un logiciel de conception d'amorce, tel que Primer 5, peut donner la valeur Tm de l'amorce.Les valeurs Tm des amorces en amont et en aval doivent être aussi proches que possible.La formule de calcul de Tm peut également être utilisée : Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Lors de l'exécution de la PCR, une température inférieure à la valeur Tm de l'amorce de 5 ° C est généralement sélectionnée comme température d'annelage (l'augmentation correspondante de la température d'annelage peut augmenter la spécificité de la réaction PCR).
- Amorces et produits PCR :
- La longueur du produit d'amplification PCR de l'amorce de conception est de préférence de 100 à 150 pb.
- Les amorces de conception dans la zone structurelle secondaire du gabarit doivent être évitées autant que possible.
- Éviter la formation de 2 bases complémentaires ou plus entre les extrémités 3' des amorces amont et aval.
- La base terminale de l'amorce 3' ne peut pas être présente avec 3 G ou C consécutifs supplémentaires.
- Les amorces elles-mêmes ne peuvent pas avoir de structures complémentaires, sinon une structure en épingle à cheveux se formera, affectant l'amplification par PCR.
- L'ATCG doit être réparti aussi uniformément que possible dans la séquence d'amorces et la base terminale 3 'doit être évitée comme T.
annexe1:Cell DirectRT-qPCR Composant du kitt supplément pack
1. Solution de lyse cellulaire
Solution de lyse cellulaire | |||
Composants du kit (système de lyse 24 puits / puits) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100T | 500 T | ||
Partieje | Tampon CL | 20ml | 100ml |
Foregene Protéase Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Tampon ST | 1 ml × 2 | 10ml | |
PartieII | Effaceur d'ADN | 400 μl | 1 ml × 2 |
Mélange RT | |
Composants du kit (système de réaction de 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200T | |
5× Mélange RT direct | 800 μl |
ddH sans RNase2O | 1,7 ml × 2 |
Mélange qPCR | ||
Composants du kit (système de réaction de 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200T | 1000T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20 × colorant de référence ROX | 40 μl | 200 μl |
ddH sans RNase2O | 1,7 ml | 10ml |
Manuels d'utilisation: