Kit d'isolement d'ARN sanguin
Description du kit :
Chat non.RE-04011/04013
Pour la purification totale de l'ARN du sang total 104 ≤ Globules blancs ≤ 107
Isolez et purifiez rapidement l'ARN sanguin des globules blancs.
-Pas besoin de s'inquiéter de la dégradation de l'ARN.L'ensemble du kit est sans RNase
-Simple—toutes les opérations sont effectuées à température ambiante
-Rapide—l'opération peut être complétée en 20 minutes
- Rendement élevé en ARN : la colonne d'ARN uniquement et la formule unique peuvent purifier efficacement l'ARN
-Sûr—aucun réactif organique utilisé
-Grande capacité de traitement d'échantillons - jusqu'à 200 μl d'échantillons peuvent être traités à chaque fois.
-Haute qualité - l'ARN purifié est très pur, exempt de protéines et d'autres impuretés, et peut répondre à diverses applications expérimentales en aval.
Descriptions
Le kit adopte la colonne de spin et la formule développées par notre société, qui peuvent extraire efficacement l'ARN total de haute pureté et de haute qualité à partir de sang total anticoagulé.Le kit fournit un lysat de globules rouges (Buffer RCL), qui peut lyser rapidement et efficacement les globules rouges et retenir les globules blancs.La colonne de nettoyage d'ADN efficace peut facilement séparer le surnageant et les lysats cellulaires et adsorber et éliminer l'ADN génomique.L'opération est simple et rapide ;La colonne ARN uniquement peut lier efficacement l'ARN et, grâce à une formule unique, elle peut traiter un grand nombre d'échantillons en même temps.
L'ensemble du système RNase-Free rend l'ARN extrait non dégradable ;Le système de lavage des tampons Buffer RW1 et Buffer RW2 rend l'ARN obtenu exempt de protéines, d'ADN, d'ions et de pollution par les composés organiques.
Contenu du kit
| Kit d'isolement de l'ARN total sanguin | ||
| Composition du kit | RE-04011 | RE-04013 |
| 50 fois | 200 fois | |
| Tampon RCL (10×) | 52,5 ml | 210mL |
| Tampon BRL1* | 30mL | 120mL |
| Tampon BRL2 | 18mL | 66mL |
| Tampon RW1* | 25mL | 100mL |
| Tampon RW2 | 24mL | 96mL |
| ddH sans RNase2 O | 10mL | 40mL |
| Colonne d'ARN uniquement | 50 ensembles | 200 ensembles |
| Colonne de nettoyage d'ADN | 50 ensembles | 200 ensembles |
| manuel | 1 exemplaire | 1 exemplaire |
Fonctionnalités et avantages
-Pas besoin de s'inquiéter de la dégradation de l'ARN.L'ensemble du kit est sans RNase.
-Simple—toutes les opérations sont effectuées à température ambiante.
-Rapide—l'opération peut être effectuée en 20 minutes.
- Rendement élevé en ARN : la colonne d'ARN uniquement et la formule unique peuvent purifier efficacement l'ARN.
-Sûr—aucun réactif organique utilisé.
-Grande capacité de traitement d'échantillons - jusqu'à 200 μl d'échantillons peuvent être traités à chaque fois.
-Haute qualité - l'ARN purifié est très pur, exempt de protéines et d'autres impuretés, et peut répondre à diverses applications expérimentales en aval.
Paramètres du kit
Demande de kit :
Il convient à l'extraction et à la purification de l'ARN total du sang total de mammifère.
Flux de travail
Conditions de stockage
Le tampon RCL (10×) doit être stocké à 2-8 ℃ ;les autres composants du kit peuvent être conservés à température ambiante (15-25 ℃) dans des conditions sèches, et peuvent être conservés pendant 12 mois.Le tampon BRL1 peut être stocké à 4 ℃ pendant 1 mois après l'ajout de β-mercaptoéthanol (facultatif).
Remarque : si elle est conservée à basse température, la solution est sujette à la précipitation.Assurez-vous de placer la solution dans le kit à température ambiante pendant un certain temps avant utilisation.Si nécessaire, le préchauffer au bain-marie à 37°C pendant 10 minutes pour dissoudre le précipité, et bien mélanger avant utilisation.
Guides pour l'analyse des problèmes
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Aucun ARN ne peut être extrait ou le rendement en acide nucléique est faible
De nombreux facteurs affectent généralement l'efficacité de la récupération, tels que : la teneur en ARN de l'échantillon, la méthode de fonctionnement, le volume d'élution, etc.。
Analyse des causes communes：
1. Bain de glace ou centrifugation à basse température (4 ° C) pendant le fonctionnement.
Suggestion : Fonctionnement à température ambiante (15-25 °C), jamais de bain de glace et de centrifugeuse à basse température.
2. Stockage d'échantillons incorrect ou stockage d'échantillons trop long.
Suggestion : Conserver les échantillons à -80 °C ou les congeler dans de l'azote liquide, et éviter les utilisations répétées de congélation-décongélation ;essayez d'utiliser des échantillons fraîchement prélevés pour l'extraction d'ARN.
3.Lyse d'échantillon insuffisante
Recommandation : Veuillez vous assurer que l'échantillon et la solution de travail (Linear Acrylamide) ont été soigneusement mélangés et incubés pendant 10 min à température ambiante (15-25 ° C)
4. L'éluant n'a pas été ajouté correctement
Recommandation : Assurez-vous que ddH2O sans RNase est ajouté au milieu de la membrane de la colonne de purification
5.Improper volume d'éthanol anhydre dans le tampon viRW2
Suggestion : veuillez suivre les instructions, ajouter le volume correct d'éthanol anhydre au tampon viRW2 et bien mélanger avant d'utiliser le kit.
6. Utilisation inappropriée de l'échantillon.
Suggestion : 200 µl d'échantillon pour 500 µl de tampon viRL.Un volume d'échantillon excessif entraînera une réduction du taux d'extraction d'ARN.
7. Volume d'élution incorrect ou élution incomplète.
Suggestion : Le volume d'éluant de la colonne de purification est de 30 à 50 μl ;si l'effet d'élution n'est pas satisfaisant, il est recommandé d'ajouter du ddH sans RNase préchauffé2O et prolonger le temps de mise à température ambiante, par exemple 5-10min
8. La colonne de purification contient des résidus d'éthanol après rinçage dans le tampon viRW2.
Suggestion : S'il reste encore de l'éthanol après le rinçage dans le tampon viRW2 et la centrifugation du tube vide pendant 2 min, la colonne de purification peut être laissée à température ambiante pendant 5 min après la centrifugation du tube vide pour éliminer complètement l'éthanol restant.
La dégradation des molécules d'ARN purifiées
La qualité de l'ARN purifié est liée à des facteurs tels que le stockage des échantillons, la contamination par la RNase et le fonctionnement.
Analyse des causes communes：
1.Les échantillons collectés n'ont pas été enregistrés à temps.
Suggestion : Si l'échantillon n'est pas utilisé à temps après le prélèvement, veuillez le stocker immédiatement à -80 ℃ ou à l'azote liquide.Pour l'extraction des molécules d'ARN, essayez d'utiliser autant que possible des échantillons fraîchement prélevés.
2. Les échantillons collectés gelaient et dégelaient à plusieurs reprises.
Suggestion : Éviter la congélation et la décongélation répétées (pas plus d'une fois) pendant le prélèvement et le stockage des échantillons, sinon le rendement en acide nucléique diminuera.
3. La RNase a été introduite dans la salle d'opération ou aucun gant, masque, etc. jetable n'a été porté.
Suggestion : L'expérience d'extraction des molécules d'ARN est mieux réalisée dans une salle d'opération d'ARN séparée, et la table expérimentale est nettoyée avant l'expérience.Portez des gants et des masques jetables pendant l'expérience pour éviter la dégradation de l'ARN causée par l'introduction de la RNase.
4. Le réactif est contaminé par la RNase lors de l'utilisation.
Suggestion : remplacer par le nouveau kit d'isolement d'ARN viral pour les expériences associées.
5. La contamination par la RNase des tubes à centrifuger, des embouts de pipette, etc. Suggestion : assurez-vous que les tubes à centrifuger, les embouts de pipette et les pipettes sont tous exempts de RNase.
Les molécules d'ARN purifiées ont affecté les expériences en aval
Les molécules d'ARN purifiées par la colonne de purification affecteront les expériences en aval s'il y a trop d'ions de sel ou de protéines, telles que : transcription inverse, Northern Blot, etc.。
1.Il reste des ions de sel dans les molécules d'ARN éluées.
Recommandation : assurez-vous que le volume correct d'éthanol anhydre a été ajouté au tampon viRW2 et lavez la colonne de purification deux fois en fonction de la vitesse de centrifugation correcte indiquée dans le mode d'emploi ; s'il reste encore des ions de sel, vous pouvez ajouter le tampon viRW2 à la colonne de purification et le laisser à température ambiante pendant 5 min.Effectuez ensuite une centrifugation pour éliminer au maximum la contamination par les ions de sel
2. Il reste de l'éthanol dans les molécules d'ARN éluées
Suggestion : après avoir confirmé que les colonnes de purification ont été rincées par le tampon viRW2, effectuez une centrifugation à tube vide conformément à la vitesse de centrifugation indiquée dans le mode d'emploi.S'il reste encore de l'éthanol, on peut le laisser 5 minutes à température ambiante après une centrifugation à tube vide pour éliminer au maximum l'éthanol restant.
Manuels d'utilisation:
Manuel d'instructions du kit d'isolement de l'ARN viral
