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Kit d'isolement d'ARN total de plantes et kit de purification d'ARN total pour plantes riches en polysaccharides et polyphénols

Description du kit :

 

Cat.No.RE-05021/05022/05024

 

Pour la purification de l'ARN total à partir d'échantillons végétaux généraux contenant des composants riches en polysaccharides et polyphénols.

Extrayez rapidement de l'ARN total de haute qualité à partir d'échantillons de plantes à haute teneur en polysaccharides et polyphénols.

Sans RNase à l'aide d'une colonne de nettoyage d'ADN

Simple—toutes les opérations sont effectuées à température ambiante

Rapide—l'opération peut être terminée en 30 minutes

Sûr—aucun réactif organique utilisé union fait la force


Détail du produit

Étiquettes de produit

FAQ

TÉLÉCHARGER LES RESSOURCES

Caractéristiques

50 préparations, 200 préparations

Le kit utilise la colonne de spin et la formule développées par Foregene, qui peuvent extraire efficacement l'ARN total de haute pureté et de haute qualité de divers tissus végétaux à haute teneur en polysaccharides ou en polyphénols.Il fournit la colonne DNA-Cleaning qui peut facilement éliminer l'ADN génomique du surnageant et du lysat tissulaire.La colonne d'ARN uniquement peut lier efficacement l'ARN.Le kit peut traiter un grand nombre d'échantillons en même temps.

L'ensemble du système ne contient pas de RNase, de sorte que l'ARN purifié ne sera pas dégradé.Le tampon PRW1 et le tampon PRW2 peuvent garantir que l'ARN obtenu n'est pas contaminé par des protéines, de l'ADN, des ions et des composés organiques.

Composants du kit

Tampon PSL1, Tampon PS, Tampon PSL2

Tampon PRW1, Tampon PRW2

ddH sans RNase2O, colonne de nettoyage d'ADN

Colonne d'ARN uniquement

Fonctionnalités et avantages

■ Fonctionnement à température ambiante (15-25℃) tout au long du processus, sans bain de glace et centrifugation à basse température.
■ Kit complet RNase-Free, pas besoin de s'inquiéter de la dégradation de l'ARN.
■ Particulièrement adapté à la purification d'ARN d'échantillons végétaux de polysaccharides et de polyphénols.
■ La colonne de nettoyage d'ADN se lie spécifiquement à l'ADN, de sorte que le kit peut éliminer la contamination de l'ADN génomique sans ajouter de DNase.
■ Rendement élevé d'ARN : la colonne d'ARN uniquement et la formule unique peuvent purifier efficacement l'ARN.
■ Vitesse rapide : facile à utiliser et peut être terminé en 30 minutes.
■ Sécurité : aucun réactif organique n'est nécessaire.
■ Haute qualité : Les fragments d'ARN purifiés sont d'une grande pureté, exempts de protéines et autres impuretés, et peuvent répondre à diverses applications expérimentales en aval.

Paramètres du produit

■ Applications aval : synthèse d'ADNc premier brin, RT-PCR, clonage moléculaire, Northern Blot, etc.
■ Echantillon : Tissus végétaux frais ou congelés de polysaccharides et polyphénols
■ Dosage : 50 mg de tissu végétal
■ Capacité maximale de liaison à l'ARN de la colonne de purification : 80 μg
■ Volume d'élution : 50-200 μl

Demande de kit

Il convient à l'extraction et à la purification de l'ARN total à partir d'échantillons de tissus végétaux frais ou congelés (en particulier de tissus de feuilles de plantes fraîches) à haute teneur en polysaccharides et polyphénols.

Flux de travail

flux de travail simple pour l'ARN total de la plante

Diagramme

Kit d'isolement d'ARN total de plantes Plus 6

Plant Total RNA Isolation Kit Plus a traité 50 mg de feuilles fraîches de polysaccharides et de polyphénols, et 5 % d'ARN purifié ont été testés par électrophorèse.
1 : Banane
2: Ginkgo
3 : Coton
4 : Grenade

Stockage et durée de conservation

Ce kit peut être stocké pendant 24 mois dans des conditions sèches à température ambiante (15-25℃);s'il doit être stocké plus longtemps, il peut être stocké entre 2 et 8 ℃.
Le tampon PSL1 peut être placé à 4℃ pendant 1 mois après l'ajout de β-mercaptoéthanol (il est recommandé de l'ajouter en même temps que l'expérience).


  • Précédent:
  • Suivant:

  • La colonne bouchée

    Après colmatage de la colonne, le rendement en ARN est réduit voire impossible à purifier l'ARN, et la masse d'ARN obtenue est faible.

    Analyse de cause commune :

    1. Les pauses échantillons ne sont pas approfondies.

    La rupture de l'échantillon ne provoque pas complètement le blocage de la COLONNE DE NETTOYAGE DE L'ADN, tout en affectant le rendement et la qualité de l'ARN.Nous recommandons une opération de broyage rapide dans une quantité suffisante d'azote liquide lorsque vous cassez les échantillons. Essayez d'écraser la paroi cellulaire de l'échantillon, la membrane cellulaire et d'autres tissus.Pour les échantillons végétaux de polyol polysaccharides, nous vous recommandons d'utiliser Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

    2. Lors de l'aspiration du surnageant de l'échantillon séparé avec la colonne de nettoyage d'ADN, l'éventuel précipité fragmenté de cellules peut être inhalé.

    Les sédiments fragmentés cellulaires prélevés entraîneront la colonne RNA-ONLY qui sera bloquée lors de l'opération d'adsorption d'ARN (voir l'étape 6).Nous vous recommandons d'être prudent lors de l'aspiration de ce surnageant afin d'éviter que des débris cellulaires ne soient aspirés.

    3. La quantité initiale de l'échantillon est trop élevée.

    Une utilisation excessive de l'échantillon entraînera une fragmentation incomplète de l'échantillon ou une lyse incomplète des cellules par le tampon PSL1, entraînant le blocage de la colonne de purification pendant la purification.Kit d'isolement d'ARN total de plantes Chaque échantillon de fonctionnement purifié unique est de 50 mg.Pour les échantillons végétaux de polyol polysaccharides, nous vous recommandons d'essayer Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

    4. La température de la centrifugeuse est trop basse.

    L'ensemble du processus d'isolement et de purification de l'ARN est effectué à température ambiante (20-25°C), sauf que le tissu de l'échantillon est brisé par l'azote liquide. La température de certaines centrifugeuses cryogéniques est inférieure à 20, ce qui peut entraîner le blocage de la colonne de nettoyage d'ADN et/ou de la colonne d'ARN uniquement.Si cela se produit, réglez la température de la centrifugeuse sur 20-25, etassurez-vous que le mélange de lyse et/ou le surnageant additionné d'éthanol a été préchauffé à 37°C.

    Aucun ARN extrait ou le rendement en ARN est faible

    De nombreux facteurs affectent généralement l'efficacité de la récupération, tels que : la teneur en ARN de l'échantillon, la méthode de fonctionnement, le volume d'élution, etc.

    Analyse des causes communes comme ci-dessous :

    1.Un bain de glace ou une centrifugation à basse température (4°C) a été effectuée pendant l'opération.

    Suggestion : Faire fonctionner à température ambiante (15-25°C) dans l'ensemble du processus, ne faites pas de bain de glace et de centrifugation à basse température.

    2. L'ARN a été dégradé en raison d'une mauvaise conservation de l'échantillon ou d'une conservation à long terme de l'échantillon.

    Recommandation : les échantillons fraîchement prélevés doivent être rapidement congelés dans de l'azote liquide, puis stockés à -80 °C pendant une longue période, éviter la congélation et la décongélation répétées des échantillons ;ou trempez immédiatement les échantillons dans une solution de stabilisateur d'ARN RNAlater (échantillons d'animaux).

    3. Une fragmentation et une lyse insuffisantes de l'échantillon entraînent le blocage de la colonne de purification.

    Suggestion : Lors du broyage du tissu, assurez-vous que le tissu est suffisamment broyé et transférez-le rapidement dans le tampon PSL1 pré-préparé (confirmez que la proportion correcte de β-ME a été ajoutée, voir l'étape 1 de la procédure).

    4. L'éluant n'a pas été ajouté correctement.

    Suggestion : assurez-vous que ddH2O sans RNase est versé au milieu de la membrane de la colonne de purification.

    5.Le volume correct d'éthanol absolu n'a pas été ajouté au tampon PSL2 ou au tampon PRW2.

    Suggestion : Veuillez suivre les instructions, ajouter le volume correct d'éthanol absolu au tampon PSL2 et au tampon PRW2 et bien mélanger avant d'utiliser le kit.

    6.La quantité d'échantillon de tissu est inappropriée.

    Suggestion : Utiliser 50 mg de tissu pour 500 μl de tampon PSL1.Utiliser trop de tissu réduira la quantité d'ARN extrait et la pureté de l'ARN résultant sera également réduite.Nous recommandons fortement que le dosage initial de l'échantillon ne dépasse pas 50 mg par opération d'extraction d'ARN.

    7.Volume d'élution inapproprié ou élution incomplète.

    Suggestion : Le volume d'éluant de la colonne de purification est de 50-200 μl ;si l'effet d'élution n'est pas satisfaisant, il est recommandé de prolonger le temps à température ambiante après l'ajout de ddH2O sans RNase préchauffé, par exemple 5 à 10 min.

    8.La colonne de purification contient des résidus d'éthanol après lavage avec BufferPRW2.

    Suggestion : Si le tube vide est centrifugé pendant 1 min et qu'il reste encore de l'éthanol après le lavage dans le tampon PRW2, vous pouvez augmenter le temps de centrifugation du tube vide à 2 min ou placer la colonne de purification à température ambiante pendant 5 min pour éliminer complètement l'éthanol résiduel.

    9.Le kit a été utilisé de manière incorrecte.

    Suggestion : pour les échantillons de plantes de polysaccharides polyphénoliques, l'utilisation de kits courants tels que le kit d'isolement d'ARN total de plantes peut ne pas être en mesure d'obtenir des échantillons d'ARN idéaux.Nous vous recommandons d'utiliser Plant Total RNA IsolationKit Plus, qui est spécialement conçu pour les échantillons de plantes polysaccharides polyphénoliques.Un kit spécialement développé pour l'extraction d'ARN à partir d'échantillons végétaux de polyphénols et de polysaccharides.

    La valeur OD260/OD280 est faible

    L'élution d'ARN avec ddH2O et utilisée pour les lectures de spectrophotomètre donne de faibles valeurs OD260/OD280.Nous recommandons d'utiliser du Tris-HCl 10 mM, pH 7,5 (plutôt que du ddH2O sans RNase pour éluer l'ARN) pour obtenir des valeurs OD260/OD280 relativement correctes, voir « Analyses de concentration et de purification de l'ARN » à la page 19.

    L'ARN purifié est dégradé

    La qualité de l'ARN purifié est liée à des facteurs tels que la conservation de l'échantillon, la contamination par la RNase et la manipulation.

    Analyse des causes communes :

    1. Les échantillons de tissus n'ont pas été stockés à temps après le prélèvement.

    Recommandation : si les échantillons de tissus ne sont pas utilisés à temps après le prélèvement, veuillez les stocker immédiatement dans de l'azote liquide à basse température ou les transférer à -80 °C pour un stockage à long terme après congélation rapide dans de l'azote liquide, ou immergez immédiatement les échantillons dans une solution RNAlater de stabilisateur d'ARN (échantillons d'animaux).Pour l'extraction d'ARN, essayez d'utiliser des échantillons de tissus fraîchement prélevés.

    2.Congélation et décongélation répétées d'échantillons de tissus.

    Suggestion : lors du stockage des échantillons de tissus, il est préférable de les couper en petits morceaux pour les conserver et d'en retirer une partie lors de leur utilisation pour éviter la dégradation de l'ARN causée par la congélation et la décongélation répétées des échantillons.

    3. La RNase est introduite dans la salle d'opération ou des gants jetables non portés, des masques, etc.

    Suggestion : Les expériences d'extraction d'ARN sont mieux réalisées dans des opérations d'ARN séparées, et la table de laboratoire doit être nettoyée avant l'expérience, et des gants et des masques jetables doivent être portés pendant l'expérience pour éviter la dégradation de l'ARN causée par l'introduction de RNase dans la plus grande mesure.

    4. Le réactif est contaminé par la RNase pendant l'utilisation.

    Suggestion : remplacer par une nouvelle série de kits d'extraction d'ARN total de plantes pour des expériences connexes.

    5.Les tubes de centrifugation et les embouts de pipette utilisés pour la manipulation de l'ARN sont contaminés par la RNase.

    Suggestion : assurez-vous que les tubes à centrifuger, les embouts de pipette, les pipettes, etc. utilisés dans l'extraction d'ARN sont tous exempts de RNase.

    Manuels d'utilisation:

    Plant Total RNA Isolation Kit Plus Manuel d'instructions

     

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