Construire un système SOP

Établir l'expérience PCR SOP pour normaliser le comportement du personnel de l'expérience.

Les expérimentateurs respectent strictement les procédures opératoires et minimisent la pollution PCR pouvant être causée par des facteurs humains ou empêchent l'apparition de pollution dans l'opération.En outre, l'expérimentateur doit posséder les connaissances et compétences professionnelles correspondantes, notamment la maîtrise de l'utilisation des équipements connexes, la clarification de l'ensemble du processus de travail, la maîtrise des méthodes de traitement de la contamination et des méthodes de contrôle de la qualité en laboratoire, et la capacité d'interpréter correctement les résultats des tests.

Laboratoire de PCR standard du bâtiment

Le laboratoire PCR est divisé en quatre zones en principe, à savoir la zone de préparation des réactifs, la zone de traitement des échantillons, la zone d'amplification et la zone d'analyse des produits d'amplification.Les deux premières zones sont des zones de pré-amplification, et les deux dernières zones sont des zones de post-amplification.La zone de pré-amplification et la zone de post-amplification doivent être strictement séparées.Les matériaux expérimentaux, les réactifs, le papier d'enregistrement, les stylos, les matériaux de nettoyage, etc. ne peuvent circuler que de la zone de pré-amplification à la zone de post-amplification, c'est-à-dire de la zone de préparation des réactifs, de la zone de traitement des échantillons, de la zone d'amplification et de la zone d'analyse des produits d'amplification, et ne doivent pas circuler dans le sens inverse.Le flux d'air dans le laboratoire doit également circuler de la zone de pré-amplification vers la zone de post-amplification, et non dans le sens inverse.

Réduire les étapes expérimentales

Si le laboratoire n'effectue que la détection et l'identification par PCR, il est recommandé d'utiliser la PCR quantitative fluorescente au lieu de la PCR conventionnelle.

Les résultats de détection PCR quantitative de fluorescence peuvent être collectés et analysés par des signaux fluorescents, il n'est donc pas nécessaire d'ouvrir le couvercle pour l'électrophorèse après la réaction, ce qui évite la contamination des produits PCR causée par la fuite des produits de réaction pour former des aérosols.Si vous augmentez le nombre d'ouvertures de bouchons pendant l'étape de chargement de l'électrophorèse sur gel, une contamination par aérosol est susceptible de se produire.Il est recommandé de favoriser l'application de la PCR quantitative et de remplacer progressivement la PCR qualitative.

Adoptez le système anti-pollution UNG

Le système de contamination des produits anti-PCR UNG est utilisé pour la réaction PCR.

Le système utilise dUTP au lieu de dTTP.Après la réaction PCR, tous les produits PCR (fragments d'ADN) sont incorporés avec du dUTP ;lors du cycle suivant de réaction PCR, l'enzyme UNG ajoutée au système est incubée à 37 ° C pendant 5 minutes avant la PCR, qui peut être spécifique Dégrader tous les fragments d'ADN contenant du dUTP, puis effectuer une réaction PCR.Cela peut éliminer complètement la contamination par aérosol causée par les produits PCR.L'effet est illustré dans la figure ci-dessous :

Remarque : Pour la série PCR directe, vous pouvez choisir les produits de la série du système de pollution des produits anti-PCR de FJ Biotech

Suggérer

Pour les laboratoires qui effectuent des tests de génotypage à grande échelle, il est fortement recommandé d'utiliser le système de contamination des produits anti-PCR UNG pour tester les réactifs en plus de la construction de laboratoires raisonnables.

Rappel : L'utilisation de ce système ne peut pas éliminer la contamination du produit PCR qui a déjà été causée.Par conséquent, le système UNG doit être utilisé au début du test concerné, et le système UNG doit toujours être utilisé pour l'amplification PCR, afin d'éviter la contamination des produits PCR.Faux positif.

Il est recommandé d'utiliser le système Direct PCR-UNG de Forge Biotech lors de la réalisation de tests à grande échelle, tels que : Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG ;

Kit de PCR directe de semences de plantes-UNG ;

Kit de PCR directe de tissus animaux-UNG ;

Kit de PCR directe de queue de souris-UNG ;

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG。

Cette série de kits de Foregene peut non seulement effectuer une détection PCR rapidement et à grande échelle, mais également prévenir et contrôler efficacement la contamination des produits PCR.