Les micro-organismes pathogènes sont des micro-organismes qui peuvent envahir le corps humain, provoquer des infections et même des maladies infectieuses, ou pathogènes.Parmi les agents pathogènes, les bactéries et les virus sont les plus nocifs.

L'infection est l'une des principales causes de morbidité et de décès chez l'homme.Au début du 20e siècle, la découverte de médicaments antimicrobiens a changé la médecine moderne, donnant aux humains une «arme» pour combattre les infections, et rendant également possibles la chirurgie, la transplantation d'organes et le traitement du cancer.Cependant, il existe de nombreux types d'agents pathogènes qui causent des maladies infectieuses, notamment des virus, des bactéries, des champignons et d'autres micro-organismes.Afin d'améliorer le diagnostic et le traitement de diverses maladies et de protéger la santé des personnes

La santé nécessite des techniques de test clinique plus précises et plus rapides.Quelles sont donc les technologies de détection microbiologique ?

01 Méthode de détection traditionnelle

Dans le processus de détection traditionnelle des micro-organismes pathogènes, la plupart d'entre eux doivent être colorés, cultivés et l'identification biologique est effectuée sur cette base, de sorte que différents types de micro-organismes puissent être identifiés et que la valeur de détection soit élevée.Les méthodes de détection traditionnelles comprennent principalement la microscopie de frottis, la culture de séparation et la réaction biochimique, et la culture de cellules tissulaires.

1 Microscopie de frottis

Les micro-organismes pathogènes sont de petite taille et la plupart sont incolores et translucides.Après les avoir colorées, elles peuvent être utilisées pour observer leur taille, leur forme, leur disposition, etc. à l'aide d'un microscope.L'examen microscopique par coloration directe des frottis est simple et rapide, et il est toujours applicable aux infections microbiennes pathogènes avec des formes spéciales, telles que l'infection gonococcique, Mycobacterium tuberculosis, l'infection à spirochètes, etc. pour le diagnostic préliminaire précoce.La méthode d'examen photomicroscopique direct est plus rapide et peut être utilisée pour l'inspection visuelle des agents pathogènes avec des formes spéciales.Il ne nécessite pas d'instruments et d'équipements spéciaux.C'est encore un moyen très important de détection des micro-organismes pathogènes dans les laboratoires de base.

2 Culture de séparation et réaction biochimique

La culture de séparation est principalement utilisée lorsqu'il existe de nombreux types de bactéries et que l'une d'entre elles doit être séparée.Il est principalement utilisé dans les crachats, les matières fécales, le sang, les liquides organiques, etc. Parce que les bactéries se développent et se multiplient pendant une longue période, cette méthode de test nécessite un certain temps., Et ne peut pas être traité par lots, de sorte que le domaine médical a continué à mener des recherches à ce sujet, en utilisant des équipements de formation et d'identification automatisés pour améliorer les méthodes de formation traditionnelles et améliorer la précision de la détection.

3 Culture de cellules tissulaires

Les cellules tissulaires comprennent principalement la chlamydia, les virus et les rickettsies.Étant donné que les types de cellules tissulaires de différents agents pathogènes sont différents, une fois les tissus retirés des micro-organismes pathogènes, les cellules vivantes doivent être cultivées par sous-culture.Des micro-organismes pathogènes cultivés sont inoculés dans des cellules tissulaires pour être cultivés afin de réduire autant que possible les changements pathologiques cellulaires.De plus, lors du processus de culture de cellules tissulaires, des micro-organismes pathogènes peuvent être directement inoculés chez des animaux sensibles, puis les caractéristiques des agents pathogènes peuvent être testées en fonction des modifications des tissus et des organes des animaux.

02 Technologie des tests génétiques

Avec l'amélioration continue du niveau de la technologie médicale dans le monde, le développement et les progrès de la technologie de détection biologique moléculaire, qui peuvent identifier efficacement les micro-organismes pathogènes, peuvent également améliorer l'état actuel de l'application des caractéristiques morphologiques et physiologiques externes dans le processus de détection traditionnel, et peuvent utiliser des gènes uniques. La séquence de fragments identifie les types de micro-organismes pathogènes, de sorte que la technologie des tests génétiques est largement utilisée dans le domaine des tests médicaux cliniques avec ses propres avantages uniques.

1 Réaction en chaîne par polymérase (PCR)

La réaction en chaîne par polymérase (Polymerase Chain Reaction, PCR) est une technique qui utilise des amorces oligonucléotidiques connues pour guider et amplifier une petite quantité du fragment de gène à tester dans un fragment inconnu in vitro.Parce que la PCR peut amplifier le gène à tester, elle est particulièrement adaptée au diagnostic précoce d'une infection pathogène, mais si les amorces ne sont pas spécifiques, elle peut provoquer des faux positifs.La technologie PCR s'est développée rapidement au cours des 20 dernières années et sa fiabilité s'est progressivement améliorée, passant de l'amplification génique au clonage et à la transformation de gènes et à l'analyse génétique.Cette méthode est aussi la principale méthode de détection du nouveau coronavirus dans cette épidémie.

Foregene a développé un kit RT-PCR basé sur la technologie PCR directe, pour la détection de 2 gènes normaux, 3 gènes et variants du Royaume-Uni, du Brésil, d'Afrique du Sud et d'Inde, la lignée B.1.1.7 (UK), la lignée B.1.351 (ZA), la lignée B.1.617 (IND) et la lignée P.1 (BR), respectivement.

2 Technologie des puces génétiques

La technologie des puces génétiques fait référence à l'utilisation de la technologie des microréseaux pour attacher des fragments d'ADN à haute densité à des surfaces solides telles que des membranes et des feuilles de verre dans un certain ordre ou arrangement grâce à la robotique à grande vitesse ou à la synthèse in situ.Avec des sondes d'ADN marquées par des isotopes ou par fluorescence, et à l'aide du principe d'hybridation complémentaire de bases, un grand nombre de techniques de recherche telles que l'expression et le suivi des gènes ont été réalisées.L'application de la technologie des puces génétiques au diagnostic des micro-organismes pathogènes peut réduire considérablement le temps de diagnostic.En même temps, il peut également détecter si l'agent pathogène a une résistance aux médicaments, à quels médicaments sont résistants et à quels médicaments sont sensibles, afin de fournir des références pour les médicaments cliniques.Cependant, le coût de production de cette technologie est relativement élevé et la sensibilité de la détection des copeaux doit être améliorée.Par conséquent, cette technologie est encore utilisée dans la recherche en laboratoire et n'a pas été largement utilisée dans la pratique clinique.

3 Technologie d'hybridation des acides nucléiques

L'hybridation d'acide nucléique est un processus dans lequel des brins simples de nucléotides avec des séquences complémentaires dans des micro-organismes pathogènes fusionnent dans des cellules pour former des hétéroduplex.Le facteur conduisant à l'hybridation est la réaction chimique entre l'acide nucléique et les sondes pour identifier les micro-organismes pathogènes.A l'heure actuelle, les techniques de recroisement d'acides nucléiques utilisées pour détecter des microorganismes pathogènes comprennent principalement l'hybridation in situ d'acides nucléiques et l'hybridation par transfert membranaire.L'hybridation in situ d'acide nucléique fait référence à l'hybridation d'acides nucléiques dans des cellules pathogènes avec des sondes marquées.L'hybridation par transfert membranaire signifie qu'après que l'expérimentateur a séparé l'acide nucléique de la cellule pathogène, il est purifié et combiné avec un support solide, puis hybride avec la sonde comptable.La technologie d'hybridation comptable présente les avantages d'un fonctionnement pratique et rapide et convient aux micro-organismes pathogènes sensibles et ciblés.

03 Tests sérologiques

Les tests sérologiques permettent d'identifier rapidement les micro-organismes pathogènes.Le principe de base de la technologie des tests sérologiques est de détecter les agents pathogènes grâce à des antigènes et des anticorps pathogènes connus.Par rapport à la séparation et à la culture traditionnelles des cellules, les étapes de fonctionnement des tests sérologiques sont simples.Les méthodes de détection couramment utilisées comprennent le test d'agglutination au latex et la technologie d'immunodosage enzymatique.L'application de la technologie d'immunodosage enzymatique peut grandement améliorer la sensibilité et la spécificité des tests sérologiques.Il peut non seulement détecter l'antigène dans l'échantillon de test, mais également détecter le composant anticorps.

En septembre 2020, l'Infectious Diseases Society of America (IDSA) a publié des lignes directrices pour les tests sérologiques pour le diagnostic du COVID-19.

04 Tests immunologiques

La détection immunologique est également appelée technologie de séparation des billes immunomagnétiques.Cette technologie peut séparer les bactéries pathogènes et non pathogènes dans les agents pathogènes.Le principe de base est : l'utilisation de microsphères à billes magnétiques pour séparer l'antigène unique ou plusieurs types d'agents pathogènes spécifiques.Les antigènes sont assemblés et les bactéries pathogènes sont séparées des agents pathogènes par la réaction du corps antigénique et du champ magnétique externe.

Points chauds de détection d'agents pathogènes - détection d'agents pathogènes respiratoires

Le « kit de détection des 15 bactéries pathogènes du système respiratoire » de Foregene est en cours de développement.Le kit peut détecter 15 types de bactéries pathogènes dans les expectorations sans qu'il soit nécessaire de purifier l'acide nucléique dans les expectorations.En termes d'efficacité, il raccourcit les 3 à 5 jours d'origine à 1,5 heure.