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Introduction:

L'ARN, nom scientifique de l'acide ribonucléique, son abréviation vient de RiboNucleic Acid, est un type d'acide nucléique formé en connectant au moins des dizaines de ribonucléotides par des liaisons phosphodiester.

Le principe de l'exploration de l'ARN est d'extraire l'ARN total sans pollution, et le principe de base de l'extraction de l'ARN peut être résumé approximativement comme suit :

1. Perturbez d'abord les cellules

2. Éliminer ensuite les impuretés macromoléculaires (protéines, lipides, ADN, etc.)

3. Enfin, l'ARN est précipité tout en éliminant les sels et les solvants organiques, et en purifiant davantage l'ARN

Passé et présent de la méthode d'extraction

La première génération de méthode d'extraction d'ARN est la méthode de précipitation TRIzol (les réactifs utilisés comprennent l'isothiocyanate de guanidine, le phénol, le chloroforme, etc.) inventée par un grand-père nommé Piotr Chomczynski et la grand-mère Nicoletta Sacchi, car cette invention permet une extraction d'ARN rapide et facile, depuis lors a commencé l'essor de la recherche sur l'ARN.

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Plus tard, grand-père a vendu ce brevet à Invitrogen, et Invitrogen a fait la promotion de cette méthode dans le monde et est devenue une méthode largement utilisée.

Plus tard, Invitrogen a été racheté par Thermo !

Produit représentatif : réactif TRIzol d'Invitrogen

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Cependant, la méthode de précipitation TRIzol nécessite de multiples précipitations et extractions d'ARN, et les réactifs utilisés sont toxiques et longs à opérer.

Par conséquent, la méthode de purification enzymatique sur colonne de deuxième génération a vu le jour, utilisant une membrane de gel de silice comme matériau d'adsorption d'acide nucléique spécifique pour maximiser la récupération de l'ARN dans l'échantillon tout en éliminant les autres impuretés.

La méthode de deuxième génération simplifie l'opération sur la base de performances stables, réduit le facteur de risque et améliore l'efficacité de l'extraction d'ARN.

Produits représentatifs : QIAGEN RNeasy et la plupart des produits domestiques

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Cependant, les méthodes de première et de deuxième génération nécessitent l'utilisation de DNase pour éliminer la contamination par l'ADN, ce qui entraîne certains inconvénients pour les expériences ultérieures en aval.La DNase résiduelle réduira l'efficacité de la transcription inverse et réduira la synthèse d'ADNc du premier brin, affectant ainsi la précision des résultats.

Par conséquent, le procédé d'extraction de troisième génération est optimisé sur la base de la deuxième génération.L'expérience n'a pas besoin d'ajouter d'enzymes et l'ARN peut être facilement obtenu avec seulement deux colonnes.

Colonne 1 : Colonne de nettoyage d'ADN pour nettoyer l'ADN

Colonne 2 : la colonne ARN uniquement adsorbe et récupère spécifiquement l'ARN

Une opération aussi simple permet non seulement de gagner du temps, mais facilite également le fonctionnement des expériences en aval !

Produits représentatifs : QIAGEN RNeasy Plus etPrégèneProduits de la série de purification d'ARN

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(RNeasy Plus)

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ForegeneKit d'isolement d'ARN total de plantes)

Dites-vous tranquillement!Le kit ARN de Foregene présente également un effaceur de RNase super facile à utiliser, qui peut éliminer complètement 400 μg de RNase sur la surface solide en 1 minute, sans ajouter de substances toxiques au corps humain !

Photo1 : Tableau comparatif des processus opérationnels

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Les produits Foregene peuvent compléter l'extraction d'ARN en seulement deux chansons, ne rendez pas les autres jaloux de la progression de votre expérience !

Photo2 :Erésultats expérimentaux tableau de comparaison

La première génération (1 : TRIzol)

La seconde génération (2 : RNeasy de QIAGEN)

La troisième génération (3 : RNeasy plus de QIAGEN, 4 : Foregene)

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Photo3 : graphique qPCR (graphique de la courbe d'amplification)

La première génération (vert signifie TRIzol -, rouge signifie TRIzol +)

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La deuxième génération (bleu ciel signifie QIAGEN RNeasy-, rouge signifie QIAGEN RNeasy +)

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La troisième génération (le bleu signifie QIAGEN RNeasy plus, le vert signifie Foregene)

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(Remarque : le graphique qPCR "-" indique que la DNase n'a pas été ajoutée et que la contamination par l'ADN n'a pas été supprimée. Par conséquent, le CT est plus élevé et le résultat n'est pas précis ; "+" indique que la DNase a été ajoutée et la contamination par l'ADN a été supprimée, le résultat est précis)

Chaque mise à niveau technique signifie que le fonctionnement de l'expérience évolue dans une direction plus simple et plus conviviale.

Foregene vise à aider davantage de chercheurs scientifiques à économiser du temps et des coûts expérimentaux, à obtenir des résultats expérimentaux de haute qualité et à créer conjointement des réalisations de recherche scientifique plus précieuses.


Heure de publication : 09 juillet 2021