1：Remplacez les fournitures expérimentales à temps

Configurez le contrôle négatif (NTC) et répétez-le plusieurs fois.Une fois qu'il est constaté qu'il y a une contamination du produit PCR dans le laboratoire, remplacez toutes les fournitures expérimentales à temps.Tels que : rediluer et préparer les amorces, restériliser la pointe de la pipette, le tube EP, ddH2O, etc., remplacer par une nouvelle pipette et emprunter temporairement d'autres laboratoires pour effectuer des expériences de PCR.Le laboratoire contaminé doit être ventilé et irradié aux rayons ultraviolets jusqu'à ce que la contamination par le produit PCR soit éliminée avant de poursuivre l'expérience.

2：Prolonger le temps d'exposition aux UV

Il convient de noter que pour éliminer la contamination par l'ADN, le rayonnement ultraviolet régulier doit être prolongé de 2 heures par rapport à la normale.Même ainsi, l'effet de l'irradiation UV sur l'élimination de petits fragments (inférieurs à 200 pb) de contamination par l'ADN n'est toujours pas bon.

La longueur d'onde ultraviolette (nm) est généralement de 254/300 nm, et il suffit d'irradier pendant 30 minutes.Il convient de noter que lors du choix des UV pour éliminer la contamination des produits PCR résiduels, la longueur du produit PCR et la distribution des bases dans la séquence du produit doivent être prises en compte.L'irradiation UV n'est efficace que pour les fragments longs supérieurs à 500 pb et a peu d'effet sur les fragments courts.

Au cours de l'irradiation UV, les bases pyrimidiques du produit PCR formeront des dimères.Ces dimères peuvent terminer l'extension, mais toutes les pyrimidines de la chaîne d'ADN ne peuvent pas former de dimères, et l'irradiation UV peut également casser les dimères..Le degré de formation de dimère dépend de la longueur d'onde UV, du type de dimère de pyrimidine et de la séquence de nucléotides adjacents au site du dimère.Par conséquent, si les fragments amplifiés par PCR sont de petite taille, il est recommandé d'utiliser le système de contamination des produits anti-PCR UNG.

3：Épurateurs de pollution par ADN couramment utilisés

Les aérosols sont facilement générés lorsque des pipettes sont ajoutées, ce qui est difficile à éviter, et cela se déposera rapidement.Par conséquent, il est sans aucun doute un bon choix d'utiliser fréquemment des piégeurs spéciaux de pollution par l'ADN pour empêcher la propagation de la pollution par l'ADN.

4：Utilisez le système anti-pollution UNG

Une fois la contamination du produit PCR éliminée, le laboratoire de test peut utiliser le système de contamination du produit anti-PCR UNG pour empêcher la contamination du produit PCR.Dans les laboratoires généraux, vous pouvez effectuer de simples partitions expérimentales, séparer strictement la zone des produits PCR des autres zones, établir certaines règles et réglementations de laboratoire et mener une formation pertinente pour éviter la contamination des produits PCR.

Recommandations : L'établissement d'un laboratoire PCR raisonnable, le maintien d'un bon environnement PCR, la formulation de procédures d'exploitation PCR standard et la culture de la conscience opérationnelle rigoureuse des expérimentateurs sont les clés pour prévenir ou réduire la pollution des expériences PCR.