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La naissance de la PCR

PCR (réaction en chaîne par polymérase)

Plus de 30 ans se sont écoulés depuis l'invention de la réaction en chaîne par polymérase.Depuis plus de 30 ans, après que de nombreux chercheurs du monde entier ont continué à compléter et à s'améliorer, la technologie PCR est devenue la méthode de recherche fondamentale la plus largement et la plus fréquemment utilisée et la plus importante dans l'ensemble du domaine des sciences de la vie.

La PCR TouchDown, la PCR en temps réel, la Multi PCR, etc. développées sur la base d'une large application de la technologie PCR traditionnelle, ainsi que la nouvelle PCR numérique (PCR numérique), ont considérablement enrichi les méthodes de recherche de la majorité des chercheurs scientifiques et ont grandement accéléré le processus de développement des sciences de la vie modernes, en particulier la biologie moléculaire, a apporté de grandes contributions à l'étude de la vie et de la nature de l'humanité dans son ensemble.

Principe PCR
Polymerase-Chain-Reaction-PCR

Défauts de la technologie PCR traditionnelle

Séparation d'acides nucléiques complexes etextraction:

★ Technologie PCR traditionnelle : requise

★ Technologie dérivée de la PCR : requise

★ Échantillons d'ADN et d'ARN : grandes différences, exigences de fonctionnement difficiles

★ Dangers corporels : les réactifs toxiques nuisent à l'organisme

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La technologie PCR traditionnelle et la technologie dérivée ont une séparation et une purification préalables des acides nucléiques

Tout échantillon biologique doit passer par une série de traitements d'échantillons compliqués et fastidieux pour obtenir des échantillons d'acide nucléique qui répondent aux exigences de la technologie PCR.

La séparation et l'extraction de l'ADN et de l'ARN ont toujours été une tâche fondamentale que les chercheurs scientifiques concernés doivent répéter chaque jour.

En raison des énormes différences entre les échantillons, les processus de séparation et d'extraction de l'ADN et de l'ARN sont également très différents.Ce travail nécessite un haut niveau de compétence technique pour les opérateurs.Les techniques traditionnelles de séparation et d'extraction nécessitent un contact à long terme avec certains réactifs chimiques hautement toxiques.Cela causera des dommages irréversibles au corps de l'opérateur, et même des dommages directs pendant l'expérience.

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Dans le même temps, pour ceux qui ont un grand nombre d'échantillons à étudier, la séparation et l'extraction des acides nucléiques est une tâche laborieuse.

Les kits d'isolement et d'extraction d'acide nucléique sur le marché sont maintenant matures et il existe de nombreuses marques, mais elles sont à peu près les mêmes.Qu'il s'agisse d'un kit de centrifugation sur colonne à membrane de gel de silice ou d'un kit de méthode à billes magnétiques, cela prend beaucoup de temps et coûte cher.En plus du coût du kit, il existe également des exigences particulières pour l'équipement de laboratoire.Le poste de travail automatisé utilisé dans la méthode des billes magnétiques est un équipement très typique à grande échelle et de grande valeur, ce qui représente une dépense énorme pour le laboratoire.

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En résumé

Avant de mener des expériences de PCR, le prétraitement des échantillons est un casse-tête inévitable et toujours pour les chercheurs.Comment résoudre ce problème et si les expériences de PCR peuvent être réalisées sans la séparation et l'extraction des acides nucléiques a toujours été la pensée de la majorité des chercheurs scientifiques et du personnel de laboratoire clinique.

La solution de Foregene

Après des années de recherche minutieuse sur la technologie de PCR directe et les kits associés, Forgene a réussi à surmonter de nombreux goulots d'étranglement et à réaliser avec succès une PCR directe pour de nombreux types d'échantillons différents avec une forte résistance et adaptabilité, permettant aux chercheurs de se débarrasser de la séparation et de l'extraction lourdes et dangereuses des acides nucléiques.Cela réduira considérablement l'intensité de travail de chacun, accélérera le processus d'expérimentation et réduira les coûts de recherche scientifique et de test.

La compréhension et la connaissance de Forgene de DirectPCR

Premièrement, la technologie DirectPCR est une technologie de PCR directe pour divers tissus d'échantillons biologiques.Dans cette condition technique, il n'est pas nécessaire de séparer et d'extraire les acides nucléiques, et l'échantillon de tissu est directement utilisé comme objet, et les amorces du gène cible sont ajoutées pour la réaction PCR.

Deuxièmement, la technologie DirectPCR n'est pas seulement une technologie traditionnelle d'amplification de matrice d'ADN, mais comprend également la PCR de transcription inverse de matrice d'ARN.

Troisièmement, la technologie DirectPCR effectue non seulement directement des réactions PCR qualitatives de routine sur des échantillons de tissus, mais inclut également des réactions qPCR en temps réel, ce qui nécessite que le système de réaction ait une forte capacité à résister aux interférences de fluorescence de fond et à s'opposer aux extincteurs de fluorescence endogènes.

Quatrièmement, les échantillons de tissus ciblés par la technologie DirectPCR ne nécessitent que la libération de matrices d'acides nucléiques et n'éliminent pas les protéines, les polysaccharides, les ions sels, etc. qui interfèrent avec la réaction PCR.Cela nécessite que la polymérase d'acide nucléique et le mélange PCR dans le système de réaction aient une excellente anti-réversibilité et adaptabilité, et puissent garantir l'activité enzymatique et la précision de la réplication dans des conditions complexes.

Cinquièmement, les échantillons de tissus ciblés par la technologie DirectPCR n'ont été soumis à aucun traitement d'enrichissement d'acide nucléique, et la quantité de matrice est très faible, ce qui nécessite une sensibilité et une efficacité d'amplification extrêmement élevées du système de réaction.

Conclusion

La technologie DirectPCR est l'un des développements et innovations technologiques les plus importants des 30 dernières années depuis la naissance de la technologie PCR.Forgene a été et continuera d'être un pionnier et un innovateur de cette technologie.

La perspective d'application de la technologie DirectPCR est très large.L'amélioration continue et la promotion de cette technologie apporteront sûrement des changements subversifs à la recherche scientifique et au travail d'inspection.Il s'agit d'une révolution technologique PCR.


Heure de publication : 21 février 2017