• Facebook
  • LinkedIn
  • Youtube

W :Frère, la transcription inverse est terminée, et enfin la dernière étape : la PCR quantitative fluorescente !Hé, mon frère, qu'est-ce que la PCR quantitative en temps réel ?
M : PCR, vous savez toujours, n'est-ce pas ?
W : Vous savez, la PCR est la réaction en chaîne de la polymérase, et c'est une technologie qui augmente l'ADN !
M : C'est presque… C'est une méthode technique pour amplifier la séquence cible à plus d'un million de fois grâce à des amorces spécifiques, mais cela indique seulement la présence ou l'absence de la séquence cible, et ne peut pas déterminer la quantité de matrice initiale.La PCR quantitative par fluorescence est une méthode technique développée pour résoudre ce problème.La PCR en temps réel et la PCR en quantité (qPCR) y font généralement référence.
W : La différence avec la PCR ordinaire réside dans la quantification de la fluorescence ?
M : Oui, c'est-à-dire qu'à l'étape d'extension de chaque cycle de PCR, l'intensité du signal de fluorescence est détectée et la quantité de matrice initiale peut être calculée en fonction du changement de l'intensité du signal.
W : C'est tellement compliqué !Dois-je le calculer moi-même ?
M : Cela nécessite d'apprendre lentement, il est préférable de pouvoir comprendre le principe.Vous pouvez maintenant vous concentrer d'abord sur la valeur CT, qui est une donnée expérimentale relativement intuitive, et sa taille correspond à la taille de la quantité initiale du modèle.Il existe également des graphiques tels que des courbes d'amplification et des courbes de fusion.Ils ont le dernier mot sur la réussite ou l'échec de votre expérience.
W : Oh, mon frère.Ensuite, je vais faire l'expérience qPCR !
M : Faites particulièrement attention à ne pas ajouter de gabarits dans la zone des réactifs, sinon votre mélange inutilisé sera facilement contaminé !
W : J'ai compris !

1

Kit PCR en temps réel Easyᵀᴹ-SYBR Green I

Plus grande efficacité, plus grande spécificité
Haute sensibilité, bonne compatibilité

2 3


Heure de publication : 22 juillet 2022